Extracción de plásmidos

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El AFTSpin EndoFree Plasmid Maxi Kit permite la extracción rápida y purificación de ADN plasmídico de alta copia con baja endotoxina. El AFTSpin Plasmid Mini Kit ofrece una extracción eficiente y de alta pureza de ADN plasmídico, siendo fácil de usar y con un rendimiento estable.

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Extracción de plásmidos

El AFTSpin EndoFree Plasmid Maxi Kit permite la extracción rápida y purificación de ADN plasmídico de alta copia con baja endotoxina. El AFTSpin Plasmid Mini Kit ofrece una extracción eficiente y de alta pureza de ADN plasmídico, siendo fácil de usar y con un rendimiento estable.

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Descripción

AFTSpin EndoFree Plasmid Maxi Kit (RK30103)

Este kit es capaz de lisar células utilizando un método de lisis alcalina modificado con SDS. El extracto crudo se une selectivamente a un captador de endotoxinas único y se centrifuga para eliminar las endotoxinas. La membrana basada en sílice en la columna de adsorción centrífuga puede unir el ADN plasmídico en la solución de manera selectiva bajo condiciones de alto contenido de sal y bajo pH, y luego se pueden eliminar las impurezas y otros componentes bacterianos mediante la solución de desproteinización PR y la solución de lavado WB. Finalmente, eluente EB, de bajo contenido de sal y alto pH, eluye el ADN plasmídico puro de la membrana basada en sílice.

Características del producto:
– Alto rendimiento: se pueden extraer rápidamente de 150-300 mL de medio de cultivo Luria-Bertani entre 0.5-2 mg de ADN plasmídico de alta copia, con una tasa de extracción del 80-90%.
– Bajo contenido de endotoxinas: endotoxina <0.1 UE/μg de ADN, excelente efecto de transfección celular.
– Rendimiento estable: diferencia mínima en la capacidad de adsorción entre columnas y repetibilidad satisfactoria.

Aplicaciones:
Se puede utilizar directamente en experimentos de transfección celular, así como en varios experimentos de biología molecular como digestión enzimática, transformación, PCR, transcripción in vitro, secuenciación, etc.

Almacenamiento:
Este kit es estable durante 12 meses cuando se almacena a temperatura ambiente. El tampón ER se puede transportar a temperatura ambiente y almacenar a 4°C durante 1 mes y a -20°C durante mucho tiempo. Si se produce un precipitado al almacenar a 2-8°C, la solución en el kit debe dejarse a temperatura ambiente durante un tiempo antes de su uso y, si es necesario, precalentarse en un baño de agua a 37°C durante 10 minutos para disolver el precipitado. Las partículas ocasionales en el reactivo no afectan el resultado experimental. Antes del primer uso, se debe agregar todo el RNasa A del kit al tampón P1 (concentración final de 100 μg/mL) y almacenarlo a 2-8°C.

Más información en: https://abclonal.com/molecular-biology/AFTSpin-Plasmid-Mini-Kit/RK30101

 

AFTSpin Plasmid Mini Kit (RK30101)

El kit es capaz de lisar células utilizando un método modificado de lisis alcalina con SDS. El lisado optimizado permite que la membrana basada en sílice en la columna de adsorción centrífuga se una selectivamente al ADN plasmídico en la solución bajo condiciones de alto contenido de sal y bajo pH, y luego elimina impurezas y otros componentes bacterianos mediante la solución de desproteinización PR y la solución de lavado WB. Finalmente, el eluyente EB de bajo contenido de sal y alto pH eluye el ADN plasmídico puro de la membrana basada en sílice.

En general, se inocula un plásmido de alta copia desde una colonia única en 1.5-4.5 mL de medio LB suplementado con los antibióticos apropiados. Después de la cultura nocturna durante 12-16 horas, se pueden extraer hasta 20 µg de ADN plasmídico puro.

Características del producto:
– Fácil de usar: todo el proceso experimental se puede completar en 30 minutos sin el uso de reactivos tóxicos.
– Alta pureza: la solución de desproteinización PR es capaz de eliminar de manera efectiva las nucleasas residuales en las células huésped.
– Rendimiento estable: diferencia mínima en la capacidad de adsorción entre columnas y buena repetibilidad.

Aplicaciones:
El ADN plasmídico extraído con el kit se puede aplicar a varias operaciones rutinarias, incluyendo la digestión enzimática, PCR, secuenciación, ligación, transformación, selección de bibliotecas, traducción in vitro y transfección de algunas células convencionales pasadas.

Almacenamiento:
Este kit es estable durante 12 meses cuando se almacena a temperatura ambiente. Si se produce un precipitado al almacenarlo a 2-8°C, la solución del kit debe dejarse a temperatura ambiente antes de su uso, y si es necesario, precalentarse en un baño de agua a 37°C durante 10 minutos para disolver el precipitado. Las partículas ocasionales en el reactivo no afectan el resultado experimental. Antes del primer uso, se debe agregar todo el RNasa A del kit al tampón P1 (concentración final de 100 μg/mL) y almacenarlo a 2-8°C.

Más información: https://abclonal.com/molecular-biology/AFTSpin-Plasmid-Mini-Kit/RK30101